(一)干化學分析法原理:
1、空白(校正塊):尿在試紙塊上分佈的狀態及尿本身的顏色,一般都會給測定結果帶來誤差,設空白塊就是為了排除這些產生誤差的因素,各項目都使用同一空白塊。
2、酸鹼度:通過pH指示劑測定4.5-9的範圍內的pH值,正常人的新鮮尿液pH值在5-7之間。
3、亞硝酸鹽:反應依賴於尿中革蘭氏陰性細菌把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,亞硝酸鹽與對氨基苯砷酸反應生成重氮化合物,重氮化合物再與萘基乙二胺二鹽酸結合呈現出桃紅色。 4、葡萄糖:根據葡萄糖氧化酶法反應原理,葡糖糖氧化酶特異性氧化β-D-葡糖糖,生成葡糖糖醛酸和過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶的作用下,使指示劑氧化而呈現出藍色。 5、蛋白質:根據指示劑蛋白誤差法原理,蛋白質與染料結合形成複合物產生變色,特別是對白蛋白的反應比對球蛋白、血紅蛋白、本-周氏蛋白和粘蛋白更為靈敏。
6、隱血:根據血紅蛋白接觸活性法原理,通過血紅蛋白的類過氧化物酶樣作用催化分解過氧化物,使鄰聯甲苯胺氧化呈色。
7、膽紅素:根據偶氮偶合法的原理,2,4-二氯苯氨重氮鹽與膽紅素進行特異性反應,並與膽紅素的濃度相對應產生不同的顏色。
8、尿膽原:根據偶氮結合法的原理,尿膽原在強酸條件下和重氮鹽偶聯形成胭脂紅色素。
9、酮體:根據硝普酸鈉法原理,硝普酸鈉和酮體在鹼性條件下相互作用而呈現紫色,特別是乙醯乙酸對此特別靈敏。
(二)尿沉渣顯微鏡觀察原理
尿沉渣直接塗片法
檢測原理:此法又稱混勻1滴尿法,將尿液充分混勻,直接取其中1滴尿液塗 於 載玻片上,用顯微鏡觀察,依據尿液各種有形成分的形態特點報告結果。
尿沉渣離心鏡檢法
檢測原理:取尿液10ml,1500rpm離心5min,棄上清,留沉澱物0.2ml,混勻後取1滴尿液於載玻片上,製成塗片,顯微鏡觀察。
二. 实验内容与步骤
(一)干化學試劑帶法檢測
1.準備尿液標本:將尿液充分混勻,傾倒於試管中。
2.浸潤試紙條:將尿液於干化學試帶完全浸於尿液中 1-2s,然後立即取出。
3.除去多餘尿液:沿試管壁將試帶上多餘尿液瀝除乾淨,必要時用濾紙吸去。
4.上機檢測:把試劑帶放入尿液分析儀的凹槽中,開始檢測。
(二)尿沉渣顯微鏡觀察
1.直接鏡檢法:取新鮮尿液,混勻,取1滴於載波片上製成塗片,用顯微鏡觀察。
2.離心鏡檢法:取尿液10ml,1500rpm離心5min,棄上清,留沉澱物0.2ml,混勻後取1滴尿液於載玻片上,製成塗片,顯微鏡觀察。